ELISA試劑盒應用中效果的評價
更新時間：2016-07-18 點擊次數(shù)：1483次
由于凈化過程中引入的溶劑，可能會降低待測組分的濃度或者不適宜直接分析，需要去除全部有機溶劑。即ELISA試劑盒前處理步驟中把樣本在60℃氮氣下吹干，再用復溶液溶解干燥殘留物。
濃縮方式：氮氣吹干除雜、壓縮空氣吹干除雜。
注意：
1在吹干樣本之前，用甲醇清洗針頭，防止雜質(zhì)干擾。
2在吹樣本時，針頭應在液面上空，避免與樣本接觸，防止產(chǎn)生交叉污染。
3樣本吹干后應立即取下，避免吹的時間過長，影響zui終檢測結(jié)果。
4不同的藥物，吹干后樣本的保質(zhì)期不同，提倡待樣本回到室溫后立即復溶。
5凈化
經(jīng)過提取的待測組分中通常含有一些會干擾試劑盒中抗原抗體反應的雜質(zhì)或者是含有與待測物結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì)。將待測組分與雜質(zhì)分離的過程，我們稱為ELISA試劑盒中樣本的凈化。
1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml4℃過一夜。次日，ELISA試劑盒棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。
2.加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。
3.加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，ELISA試劑盒洗滌。
4.加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
