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天然免疫受體阻斷劑研發進展
更新時間:2015-05-12   點擊次數:1392次

目前有許多TLR的抑制劑被開發出來,但是都沒有獲得批準,因此,要想治療這一類疾病,就必須對TLR2的信號傳遞機制做更深入的研究。

首先,作者利用計算機輔助的方法,針對BB loop區刪選了所有可能插入的小分子化合物以及已經上市的藥物。他們篩選到了1000多種有可能會該區域發生互作的潛在分子,其中有149種小分子化合物以及20種上市藥物具有的TLR-2信號阻斷活性。
 
之后,作者將篩選到的化合物進行體外試驗。這些藥物分別與轉染了TLR-2的HEK293細胞進行孵育,隨后細胞經過TLR2配體的刺激并檢測下游的IL-8的表達。結果顯示,第C29號化合物能夠有效地抑制配體引起的HEK293細胞IL-18的分泌。隨后,作者在人源的單核細胞系THP-1中驗證了上述結果。接下來,作者檢測了該藥物對小鼠的TLR-2信號的阻斷效應。結果顯示,C29能夠有效地抑制TLR-1/2的信號傳遞,但不能抑制TLR2/6的信號傳遞。
 
另外,作者還發現該藥物還能夠抑制微生物本身引起的TLR2的信號傳遞。
 
隨后,作者通過生化實驗發現C29能夠抑制TLR-2激活后與下游MyD88的相互作用。并且C29能夠抑制MAPK p38以及ERK的磷酸化。
 
那么C29是否是特異性針對BB-loop區的多肽序列呢?作者設計了一系列BB-loop突變試驗,不幸的是,這些突變本身就會使得TLR-1/2的信號失活,因此無法通過這一手段證明C29的特異性。不過至少這一實驗證明了BB LOOP區結構對于TLR-1/2的信號傳遞是至關重要的。

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